Marine Drugs(IF=5.118)2021-03-28
中国科学院实验海洋生物学重点实验室 姜鹏课题组
Tetraselmis subcordiformis是一种单细胞海洋绿藻,因其富含氨基酸和脂肪酸而被广泛用于水产养殖,作为鱼类、双壳类软体动物、对虾幼虫和轮虫的初始饲料。在此基础上,建立了一种稳定的核转化体系,并采用除草剂膦thricin (PPT)作为选择性试剂。在这项研究中,以重组人组织型纤溶酶原激活剂(Reteplase)的rt-PA基因为靶基因,通过粒子轰击法导入T. subcordiformis,研究了重组人组织型纤溶酶原激活剂(Reteplase)在T. subcordiformis中的表达。通过对PPT的抗性筛选转基因藻株进行 PCR、Southern blotting和Western blotting验证rt-PA的表达,通过纤维蛋白琼脂糖平板生物活性测定验证rt-PA的生物活性。结果表明,rt-PA已被整合到T. subcorformis基因组中,表达产物具有生物活性,表明rt-PA在T. subcorformis中有适当的转录后修饰。本研究有助于利用海洋微藻作为细胞工厂制备重组药物,并在水产养殖中建立独特的口服给药途径。
原文及链接:Recombinant Expression of Thrombolytic Agent Reteplase in Marine Microalga Tetraselmis subcordiformis(Chlorodendrales, Chlorophyta)
https://doi.org/10.3390/md19060315