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海带无性繁殖系育苗技术
日期: 2022-03-24     查看次数: 436

       我国目前普遍采用夏苗培育法进行海带苗培育,其具有两大缺点:①育苗时间长、成本高、风险大。②由于育苗时混采、混育,易造成品种优良性状退化。目前一些海带育苗场开始采用无性繁殖系育苗技术,即利用海带配子体克隆进行海带苗培育,育苗50~60天幼苗即可出库下海,不仅节约近一半育苗成本,并且可保持海带良种性状不退化,产量高。现将育苗方法总结如下:

  一、无性繁殖系培养

  1.种海带准备挑选种海带的方法和程序同传统采苗方法基本相同,选择个体宽长、颜色深褐、富有光泽、健康的藻体,并且藻体上孢子囊无附着物、成熟度好。用剪刀剪下约5厘米×5厘米的孢子囊,用消毒棉花蘸煮沸后冷却海水,将附着在上面的污物拭净,然后用消毒海水冲洗数次,阴干后,放入10℃低温消毒海水中,使其放散游孢子。

  2.孢子附着游孢子数目达到2~5个/160×*时将海带取出,用纱布过滤孢子水去除黏液后,将玻片放入。当孢子在玻片附着密度达到10个左右/160×时,取出玻片放入低温消毒海水中培养。培养条件:水温10~15℃;光照强度1500~2500米烛;光照时间每日24小时光照。培养液:煮沸冷却消毒海水,硝酸钠一氮:百万分之五,磷酸二氢钾一磷:百万分之一。培养液需定时更换,一般每周换水一次。

  3.无性繁殖系初培养当配子体生长至可以区分雌雄时,用毛细管将雌、雄细胞单独取出,分别放入试管内进行培养,培养方法同上。随着雌雄配子体的快速生长,很快成为球形的丝状藻球。由于藻球内部细胞不能接受光照,因此影响了生长速度,当藻球生长至直径1~2毫米,可用消毒玻片将其压碎,转移至250毫升三角烧瓶内,不久后每个丝状细胞段又可重新长成藻球,可再次压碎使其快速生长。

  4.无性繁殖系扩大培养

  (1)培养容器:随着无性繁殖系重量增大,可将其转移至大的容器内培养。由于玻璃器皿易碎且普遍价格较高,可用矿泉水桶替代,轻便、耐用、实惠且培养效果好。但其透光率在50%左右,需按生长需要光强折算照射光强。

  (2)细胞团打碎:扩大培养时,由于工作量较大,不宜继续采用手工压碎,可用组织粉碎机将细胞团打碎成细胞段,一般用时10~20秒即可。

  (3)培养条件:随着培养量日渐增大,上层细胞会遮挡住培养光线,影响下层细胞的生长。为加快生长速度,减少生产成本,可向培养液中不间断充气,这样所有细胞团能够接受充足光照,同时由于细胞团周围的培养液是流动的,具有较好营养条件,可增加生长速度。随密度增大,光照强度可适当增加。

  (4)日常管理:每周换水1~2次,生长状态不佳及浓度较大时增加换水次数。换水时提前1小时停止充气,待细胞团沉降瓶底,吸出上清液,加入新鲜培养液。显微镜检查生长状态不佳有附着物时,可将细胞团倒入300目网箱,用喷雾器反复冲洗,直到无附着物为止。为避免充气时培养液污染,每日需定时开紫外线灯管半小时对空气进行消毒。

  二、采苗

  1.细胞团分离

  (1)一次分离:要达到一定出苗密度,每个育苗帘需雌性无性繁殖系3克,雄性无性繁殖系1.5克。根据育苗量将所需要的雌雄无性繁殖系混合一起,连同少量培养液置于组织粉碎仪内切割,切割时间10~20秒,切割细胞段长度约200微米,即每细胞段有10个左右细胞。

  (2)短日照培养:将一次分离后的无性繁殖系重新置于培养瓶中充气悬浮培养,每日光照时间10小时。

  (3)二次分离:第一次分离后10天左右细胞逐渐增大,色素加深,逐渐进入发育状态。此时可进行第二次分离。用组织粉碎仪再次粉碎切割,然后用500目筛绢过滤出粉碎至适当大小的细胞段用于下一步采苗,一般每细胞段有1~4个细胞。未滤出细胞段继续粉碎过滤,反复进行,直至全部达到采苗要求。

  2.采苗方法

  (1)附着基:采用常规生产中使用的棕绳苗帘,经常规处理后,系上1厘米×3厘米大小的500目筛绢,以备育苗前期日常检查使用。

  (2)附着基处理:将准备好的苗帘洗刷、伸直、低温海水浸泡预冷,单层平面式整齐摆放于已加满低温水的池中。

  (3)喷洒:将细胞液用低温海水稀释至50段/160×以下,用喷雾器均匀喷洒在摆好附着基的池子水面,使其自然均匀沉降于育苗帘的表面。

  三、育苗

  1.流水细胞段不具备主动附着的能力,容易从附着基上脱落,因此采苗后先采取静水培养,24小时后微流水(表层流速5厘米/秒以下),72小时之后正常流水(表层流速5~10厘米/秒)。这样细胞既能够正常生长发育又能够避免随水流大量流失。

  2.洗刷幼苗普遍大小4~8列细胞时虽然已出现假根,但尚有部分配子体未转成孢子体,且部分孢子体处于1~2列细胞,假根不明显。若此时洗刷,配子体和小孢子体势必脱落。若孢子体长至1毫米时开始洗刷,由于部分幼苗没有得到及时清理,影响光照使茎部弱而逐渐脱落,并影响其它幼苗茎部的健壮。所以开始洗刷的最佳时机是孢子体生长至8~16列细胞,幼苗体长0.5毫米左右时,假根明显且附着牢固。此时开始洗刷既会减少配子体及幼孢子体不必要的脱落,又会促进幼苗的正常健康生长。

  孢子体长到8~16列细胞时开始以0.5千克/平方厘米左右的较小压力洗刷,随着幼孢子体的生长及附着力的提高逐渐增加洗刷强度和次数。

  3.温度采苗期间保持水温5~6℃,静水期间不超过15℃,流水期间7~8℃。

  4.光照配子体至8列细胞前,高光3000米烛,平均光1700~1800米烛;8列细胞至0.3毫米,高光3300米烛,平均光1800~1900米烛;0.3~3毫米,高光3600米烛,平均光1900~2000米烛;3~5毫米,高光4000米烛,平均光2100~2200米烛;5~10毫米,高光4500米烛,平均光2200~2400米烛;10毫米以上,高光5000米烛以上。

  5.新水量幼苗大小5毫米前,日补充新水1/3,幼苗大小5毫米后,日补充新水1/2。

  6.营养盐幼苗大小5毫米前,硝酸钠-氮:百万分之三、磷酸二氢钾一磷:千万分之三、柠檬酸铁一铁:亿分之二;幼苗大小5毫米后,硝酸钠一氮:百万分之四、磷酸二氢钾一磷:千万分之四。

  四、小结与讨论

与传统育苗方式比较,无性繁殖系育苗技术虽经多项技术处理,其采苗效果仍达不到孢子体采苗效果。但这并不意味育苗效果也达不到孢子体育苗效果。海带育苗生产潜力较大,对采苗质量的要求有一定余地,采苗后相应的技术措施是是至关重要的,可弥补采苗质量不足,在上述一系列技术措施的实施下,两种育苗方式的育苗效果无明显差别。

       本文转载自水产门户网http://www.bbwfish.com/article.asp?artid=58687

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